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使用 LC-MS 对多肽进行定量测定

按照规定的生物分析标准对肽治疗剂和生物标志物进行定量高通量分析

肽类是治疗各种适应症的重要药物类别。与化学合成的原料药相比,它们具有高度选择性和靶向性,从而实现低毒性并降低副作用的可能性。传统上,配体结合测定 (LBA) 是药代动力学和药效学应用的默认分析方法。然而,肽治疗剂和生物标志物的免疫测定方法受到抗体对这些靶标的有限特异性的挑战。LC-MS 方法可以克服这些特异性挑战,但缺乏定量低丰度肽标记物或强效肽治疗剂所需的灵敏度。此外,一些肽类对气相碰撞诱导的解离具有抗性,从而限制了金标准分析仪、三重四极杆质谱仪和相关 MS/MS 方法的应用。

 

高分辨率质谱和纳米级液相色谱

高分辨率质谱 (HRMS)(有或没有裂解)达到了高于传统低分辨率 MS 方法的选择性水平,而与所需的色谱流速无关。这种方法克服了裂解耐药对三重四级杆肽检测的挑战。

 

纳米级液相色谱 (LC) 分离和电离在需要时提供了最高的灵敏度,通过按分子大小分离的多维色谱法进一步实现了与传统流式色谱法相当的稳健性。在反相分离上游采用分子排阻色谱法 (SEC) 的多维色谱法,可缓解灵敏度需要纳米-ESI 时与完整循环肽定量相关的稳健性问题。它可以很容易地与亲和富集方案偶联,或者与生物分析挑战规定的清理无关。

 

特别地,SEC 的加入减轻了 LC 压力问题,使得不需要基于抗体的纯化即可使用纳米-LC。例如,在 SEC、纳米-LC 和 HRMS 检测之前,开发了固相萃取 (SPE) 方法,用于定量人血浆中完整的心房钠肽 (ANP),精确至 2 pg/mL。这样可以进行高度灵敏、稳健、高通量的测量,而不会有捕获偏倚、较长孵育时间的风险,并且能够对异构体、截短或其他利钠肽进行多重检测。

 

肽类定量测量经验

我们的团队为量化肽类时遇到的挑战提供解决方案。我们利用来自多个科学学科的专业知识,开发灵敏且稳健的方法。我们在多种肽类方面拥有丰富的经验,包括但不限于:

 

  • 细胞因子
  • 铁调素
  • 视黄体
  • 胰岛素
  • 利钠肽
  • 与蛋白质融合的治疗性肽
  • 治疗多发性硬化、糖尿病、肥胖、肿瘤、NASH 和胃肠功能紊乱的治疗肽

LC/MS/MS 生物分析服务符合 GLP 和 GCP 要求,支持 FDA、经济合作与发展组织 (OECD)、MHLW、ICH 标准

我们的措施

我们提供大量作为目前 PK 研究中关键方法的生物分析服务,包括定制的液相色谱-质谱(LC/MS)服务,一项当今药代动力学(PK)测试的关键方法,以支持您的试验。我们经验丰富的工作人员利用前沿技术,包括 AB SCIEX™ / Thermo Scientific 三重四极杆质谱仪、Thermo Scientific 高分辨质谱仪和最先进的提取技术。

 

我们是成功采用免疫沉淀技术、高分辨质谱和多维液相色谱法定量肽和蛋白类生物治疗物和生物标志物的几个生物分析实验室之一。我们的团队拥有开发和验证小型和中型肽与蛋白质、融合蛋白、单克隆抗体和复杂生物模型的经验和知识。

 

检测方法的开发需经过符合全球监管要求的方法验证,样本分析严格遵循 SOP 的流程。

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