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评估您的药物间相互作用检测风险

确定您的新药/分子的任何药物间相互作用可能性

在开发新化学实体(NCE)的过程中,研究药物间相互作用 (DDI) 的可能性对于这些候选药物的进展至关重要。可能的药物间相互作用可改变伴随用药的药代动力学,改变疗效或毒性。药物间相互作用检测对这些风险进行了明确的评估,该检测应在选择主要候选物后尽早进行。作为 Q2 Solutions 的整套 ADME 服务第一部分,我们的科学家通过经验证的体外测定定期评估这些风险,以确定负责 NCE 代谢的细胞色素 P450 酶,并评估 NCE 抑制和/或诱导这些酶的可能性。这些数据将被纳入试验性新药(IND)申请的备案,为候选药物进一步开发期间的临床 DDI 评估提供指导。

体外 IND 激活 DDI 分析

对细胞色素 P450 (CYP) 酶的抑制

  • 评估供试品抑制主要细胞色素 P450 亚型的可能性:CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 和 CYP3A4(最多 3 种探针底物)
  • 在存在细胞色素 P450 亚型特异性探针底物 (~Km) 的情况下,将供试品与混合的人肝微粒体 (HLM) 和 NADPH 一起孵育
  • 预孵育 30 分钟后的时间依赖性抑制 (TDI) 的可选评估
  • 通过验证和优化的 LC-MS/MS 方法进行样品分析和定量
  • 生成 IC50 值以评估可逆性抑制和 TDI 信号(IC50转变 ≥ 1.5)
  • 如果观察到任何 CYP 酶的抑制,则可进一步进行动力学分析,以确定观察到的可逆抑制的 Ki 值和类型(竞争性等)
  • 全面 QC 审核,监管风格报告

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CYP 酶的时间依赖性抑制

  • 确定主要 CYP 亚型的时间依赖性抑制动力学:CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 和 CYP3A4
  • 将供试品与混合的人肝微粒体 (HLM) 和 NADPH 一起孵育至灭活阶段的不同时间点,然后稀释到含有细胞色素 P450 亚型特异性探针底物的活性测定混合物中
  • 通过验证和优化的 LC-MS/MS 方法进行样品分析和定量
  • 将针对每个抑制剂浓度(kobs 速率测定)确定每个灭活时间点的剩余酶活性百分比,并使用非线性回归计算动力学参数(KI 和 kinact)
  • 全面 QC 审核,监管风格报告

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CYP 酶的诱导作用

  • 通过 mRNA 分析和/或酶活性评估供试品诱导 CYP1A2、CYP2B6 和 CYP3A4 的可能性
  • 了解供试品最高浓度的预试验包括评估在培养液中的溶解度和单批次肝细胞中的细胞毒性
  • 在分析 mRNA 水平和/或添加探针底物以评估酶活性之前,将供试品与预先鉴定为对 CYP1A2、CYP2B6 和 CYP3A4 诱导有反应的平板冻存人肝细胞一起孵育
  • 可选择测定 CYP2C8、CYP2C9 和 CYP2C19 的诱导作用
  • 计算相对于溶媒对照的诱导倍数。如果诱导具有浓度依赖性且最大 > 2 倍,则计算 EC50 和 Emax 值
  • 全面 QC 审核,监管风格报告

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CYP 反应表型

  • 使用两种互补的分析设计测定参与供试品代谢的 CYP 酶
  • 通过连续抑制 CYP 活性,评估 7 种 CYP 酶在供试品代谢中的贡献百分比
  • 在有和无选择性 CYP 特异性抑制剂的情况下,将供试品与 HLM 和 NADPH 一起孵育
  • 将计算经每种 CYP 酶代谢的分数 (fm,CYP)
  • 使用重组表达的 CYP 酶评估 CYP 酶对供试品代谢的贡献百分比
  • 将使用个体 CYP 相对活性因子 (RAF) 估计经每种 CYP 酶代谢的分数
  • 全面 QC 审核,监管风格报告

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